Sci Adv｜TNF受体GITR与抗体激动剂的结构解析揭示其工作激活机制

责编｜酶美

肿瘤坏死因子 (TNF) 受体超家族包括 29 个受体，它们调控免疫细胞增殖、细胞凋亡和炎症等多种信号转导途径。糖皮质激素诱导的 TNF 受体 (GITR) 是该家族的重要成员之一，它在调节 T 细胞以促进免疫反应方面发挥着核心作用。在该受体被其配体 (GITRL) 激活的过程中，免疫学家普遍猜测存在着配体可以将受体团簇这一过程。免疫疗法中的激动剂抗体也可以激活该受体，但其机制尚不清楚。

近日来自MSKCC和康奈尔大学的Meyerson和 Merghoub研究组联合在Science Advances报道了糖皮质激素诱导的 TNF 受体 (GITR) 和其抗体激动剂的冷冻电镜结构：Therapeutic antibody activation of the glucocorticoid-induced TNF receptor by a clustering mechanism（第一作者何昌浩）。

这项研究解析了与激动性抗体 DTA-1 Fab 复合的全长 TNF 受体小鼠 GITR 的结构。该结构首次阐明了受体的寡聚状态，展现了这个稳定的二聚体的形成是由膜界面附近的疏水区域和受体胞外域顶端两个亚基间的二硫键共同决定。二聚体的每个亚基结合一个 DTA-1 Fab，表明了抗体可以团簇受体。通过点突变和流式细胞术确定并验证了受体和 Fab 之间的结合界面。

作者对纯化的全长小鼠 GITR (mGITR) ，小鼠 GITRL (mGITRL) ，DTA-1 IgG 和 Fab 进行了结合实验。这些实验表明 mGITRL 和 DTA-1 IgG 能够将 mGITR 团簇成阵列，并且 DTA-1可以竞争mGITRL并从其在 mGITR 上的结合位点置换下来。

最后，研究使用基于细胞的功能测定来比较 DTA-1 抗鼠抗体和人源蛋白GITR抗人抗体 TRX518，并显示它们能够以 IgG 而非 Fab 形式发挥作用。因此，IgG 激动剂的二价特性赋予了其模仿 GITRL 并聚集和激活 GITR 的能力。这些发现将为此类免疫肿瘤抗体的临床开发提供信息。

TNF 受体的寡聚状态长期以来一直存在争议，业内根据受体的功能状态提出了单体、二聚体和三聚体构型的假设。了解TNF 受体家族成员真正的寡聚状态对于受体如何发出信号具有深远的影响，并指导如何在治疗上调节它们的信号。虽然29个TNF受体之间的序列保守性较低，并且TNF受体胞外域的许多结构显示出多种结构和构象差异，这里报道的 mGITR 二聚体结构依然提供了一个模板来考虑更广泛的 TNF 受体家族的机理。

原文链接：

https://www.science.org/doi/epdf/10.1126/sciadv.abm4552

制版人：十一

转载须知

【非原创文章】本文著作权归文章作者所有，欢迎个人转发分享，未经允许禁止转载，作者拥有所有法定权利，违者必究。

​Sci Adv｜TNF受体GITR与抗体激动剂的结构解析揭示其工作激活机制

Sci Adv｜TNF受体GITR与抗体激动剂的结构解析揭示其工作激活机制